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操作說明書:
緩沖劑10包每包加500mL蒸餾水或純凈水溶解常溫存放
膽堿酯酶10瓶不用配制,直接取用4℃冰箱保存每份加100μL
顯色劑2瓶每瓶加26mL緩沖液溶解4℃冰箱保存每份加100μL
底物5瓶每瓶加10.3mg蒸餾水或純凈水溶解4℃冰箱保存每份加100μL
一、使用方法
(一)試劑準(zhǔn)備:
1、取緩沖溶液試劑1袋,加入500ml蒸餾水或純凈水,溶解攪拌均勻,即得pH8.0緩沖溶液。
2、酶試劑已配成溶液可直接使用。使用時(shí)每次100μL。
3、在顯色劑瓶中加入Ph8.0緩沖溶液26毫升,輕搖使*溶解。使用時(shí)每次100μL。
4、在底物瓶中加入蒸餾水10.3毫升,輕搖使*溶解。使用時(shí)每次100μL。
(二)、樣品準(zhǔn)備:
樣品不可用水沖洗,應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。為了保證取樣具有代表性,葉菜一般取來自不同植株的葉尖部樣本;果菜從不同個(gè)體的表皮處取樣。
稱取切碎或剪碎至1厘米見方左右的樣本2.0克于小燒杯(或小三角瓶等其他容器)中,加入10毫升Ph8.0緩沖溶液,振蕩振搖1分鐘或靜置3分鐘,過濾或靜置取上清液。
(三)測試:
空白對照測試:在小試管內(nèi)先加入100μL酶,然后加入2.5毫升pH8.0緩沖溶液,100μL顯色劑,100μL底物,搖勻,迅速倒入比色杯中,用儀器進(jìn)行測試。
標(biāo)本測試:在小試管內(nèi)先加入100μL酶,然后加入2.5毫升樣本提取液,100μL顯色劑,混勻靜置抑制10分鐘后,立即加入底物100μL。搖勻,馬上轉(zhuǎn)移到比色杯中,放入儀器,進(jìn)行測定。
二、測試結(jié)果判斷
抑制率>50%時(shí)檢測結(jié)果為陽性,對于陽性樣本要有2次以上重復(fù)檢測。當(dāng)抑制率達(dá)到50%以上,表明被測樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過安全標(biāo)準(zhǔn),請用氣相色譜等仲裁方法確認(rèn)。
注:在實(shí)際生產(chǎn)過程中,zui低檢測限可能會(huì)隨產(chǎn)品種類和酶活性的變化而有所波動(dòng),并可以根據(jù)客戶的具體需求做出調(diào)整。
三、注意事項(xiàng):
1、試劑開封前應(yīng)4℃冷藏,保質(zhì)期1年。
2、酶試劑可直接使用。用后4℃冷藏,開啟安瓶后請?jiān)?/span>1月內(nèi)使用完。
3、底物溶解后需0~5℃冷藏,用畢請蓋好膠塞并在1月內(nèi)使用完。
4、顯色劑溶解后可室溫保存,請?jiān)?/span>6個(gè)月內(nèi)使用完。
5、用于移取試劑或樣品的器具都要,避免交叉污染。
6、酶試劑是極易受到污染失活的試劑,因此,測試時(shí),應(yīng)先吸取酶試劑。不論酶試劑是否使用,都不能倒回去。否則,容易污染整瓶試劑造成酶試劑失效,產(chǎn)生錯(cuò)誤的測試結(jié)果。